JoVE Encyclopedia of Experiments
Mikrobiologie
0 Ansichten • 2:14 Min. • October 30th, 2025
Beginnen Sie mit einem sterilen Todd-Hewitt-Hefeextrakt oder einer THY-Agarplatte, einem nährstoffreichen Medium, das das Wachstum von Streptococcus mitis, einem pathogenen Bakterium, unterstützt.
Streifen Sie die Platte mit einer sterilen Schlaufe mit dem Bakterienstamm.
Legen Sie die geimpfte Platte in ein Kerzenglas, zünden Sie eine Kerze an, verschließen Sie das Glas luftdicht und inkubieren Sie.
Die brennende Kerze verbraucht Sauerstoff und erhöht den Kohlendioxidgehalt, wodurch eine mikroaerophile Umgebung entsteht, die wirtsähnliche Bedingungen nachahmt.
Die Nährstoffe im Medium und das mikroaerophile Milieu des Glases fördern die bakterielle Vermehrung und fördern die Entwicklung eines Virulenz-Phänotyps.
Entfernen Sie nach der Inkubation den Deckel des Glases und nehmen Sie die Platte heraus.
Entnehmen Sie mit einer sterilen Schlaufe eine einzelne isolierte Kolonie und geben Sie sie in ein steriles konisches Röhrchen mit THY-Brühe.
Inkubieren Sie die Kultur unter statischen Bedingungen, um das Bakterienwachstum zu unterstützen und gleichzeitig den Virulenzphänotyp zu erhalten.
Diese Kultur kann als pathogenes Modell zur Untersuchung von Wirt-Pathogen-Interaktionen verwendet werden.
Vor der Zubereitung von Streptokokken der Mitis-Gruppe werden die THY-Agarplatten in einem Inkubator auf 37 Grad Celsius erwärmt.
Danach verwenden Sie eine sterile Schlaufe, um die gewünschten Stämme von Streptococci auf den Platten auszustreichen.
Stellen Sie dann die Teller in ein Kerzenglas und inkubieren Sie das Glas über Nacht etwa 18 Stunden lang bei 37 Grad Celsius, um eine mikroaerophile Umgebung zu schaffen.
Nehmen Sie am nächsten Tag die Teller aus dem Kerzenglas und verwenden Sie eine sterile Schlaufe, um isolierte Kolonien zu entnehmen.
Beimpfen Sie 15 Milliliter sterile konische Röhrchen mit 2 Millilitern THY-Brühe.
Verschließen Sie die Verschlüsse fest und inkubieren Sie die Röhrchen bei 37 Grad Celsius unter statischen Bedingungen.