JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Mikrobiologie
0 Aufrufe • 3:54 Min. • October 30th, 2025
Beginnen Sie mit einer Kultur von Cyanobakterien, bei denen es sich um photosynthetische Bakterien handelt.
Diese Bakterien enthalten lipidreiche Plastoglobuli-Tröpfchen und Thylakoidmembranen, bei denen es sich um gefaltete membranöse Strukturen handelt, die reich an photosynthetischen Pigmenten sind.
Zentrifugieren Sie die Kultur und verwerfen Sie den Überstand, um von Bakterien produzierte extrazelluläre Polysaccharide zu entfernen. Waschen Sie das Pellet und suspendieren Sie es dann wieder in einem Puffer.
Verwenden Sie einen Hochdruck-Homogenisator, um eine Scherkraft zu erzeugen, die Zellwände und Membranen aufbricht.
Durch den Bruch der Thylakoidmembranen werden photosynthetische Pigmente in das Lysat freigesetzt. Die Freisetzung von Pigmenten bewirkt eine Farbveränderung, die auf einen Zellaufschluss und eine Freisetzung von Plastoglobuli hinweist.
Laden Sie das Lysat in Zentrifugenröhrchen und fügen Sie dann eine Saccharoselösung hinzu, um einen Dichtegradienten zu bilden.
Zentrifuge, um zelluläre Bestandteile nach Dichte zu trennen.
Das Thylakoid und andere schwerere Bestandteile pelletieren an der Unterseite, während die Plastoglobuli mit geringer Dichte als deutliches Band nac
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