Reinigung von cyanobakteriellen Plastoglobuli mit Dichtegradient

0 Aufrufe • 2:15 Min. • September 26th, 2025

Plastoglobuli sind lipidreiche Tröpfchen im Zytoplasma von Cyanobakterien.

Sie speichern neutrale Lipide in einem hydrophoben Kern, der von einer amphipathischen Lipid-Monoschicht mit eingebetteten strukturellen und enzymatischen Proteinen umgeben ist. Die gespeicherten Lipide werden bei Stress mobilisiert, um die Zellfunktionen zu unterstützen.

Um sie zu isolieren, beginnen Sie mit einer rohen Plastoglobuli-Fraktion, die aus Cyanobakterien gewonnen wird. Diese Fraktion ist mit Plastoglobuli angereichert und enthält einige Restkontaminantenproteine.

Mischen Sie diese Fraktion mit einer dichteren Saccharoselösung und geben Sie sie in ein Ultrazentrifugenröhrchen.

Mit einer leichteren Saccharoselösung überlagern, um einen diskontinuierlichen Dichtegradienten zu erzeugen.

Zentrifugieren Sie mit hoher Geschwindigkeit unter kalten Bedingungen, um eine thermische Degradation der Plastoglobuli zu verhindern.

Der Gradient trennt die Komponenten nach Dichte: Lipidreiche Plastoglobuli mit geringer Dichte schwimmen nach oben, während dichtere, proteinreiche Verunreinigungen absinken.

Sammeln Sie die gereinigten Plastoglobuli und frieren Sie sie in einem Gefriermedium schockein, um ihre Struktur zu e

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