JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Mikrobiologie
0 Aufrufe • 3:22 Min. • October 30th, 2025
Beginnen Sie mit keimfreien adulten C. elegans-Würmern , die in Medien suspendiert sind.
Führen Sie das Testbakterium ein und inkubieren Sie.
Während sich die Würmer ernähren, dringen Bakterien in das Darmlumen ein und haften am Epithel an.
Zentrifuge, um die Würmer zu pelletieren und die nicht aufgenommenen Bakterien zu entfernen.
In Puffer resuspendieren, zentrifugieren und die verbleibenden nicht aufgenommenen Bakterien entfernen.
Medien mit hitzeabgetöteten E. coli hinzufügen und inkubieren.
Während der Fütterung verdrängt und vertreibt der hitzeabgetötete E. coli nicht anhaftende Testbakterien aus dem Darmlumen.
Zentrifugieren und den Überstand mit den ausgestoßenen Bakterien entfernen.
Mit Puffer waschen, zentrifugieren und den Überstand entfernen.
Kühle die Würmer auf Eis, um eine Lähmung auszulösen und eine weitere Einnahme zu verhindern.
Fügen Sie eine Bleichlösung hinzu und inkubieren Sie, um verbleibende äußere Bakterien abzutöten.
Entfernen Sie das Bleichmittel und fügen Sie kalten Puffer hinzu.
Zentrifugieren und den Überstand entfernen, um Bleichmittelreste zu entfernen.
Die Würmer behalten nun nur noch lebensfähige Testbakterien, die am Darmepithel haften, was eine Quantifizierun
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