Mechanischer Aufschluss einzelner Würmer zur Beurteilung der Variabilität in Wirt-Bakterien-Interaktionen
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Mikrobiologie
0 Aufrufe • 5:09 Min. • October 30th, 2025
Beginnen Sie mit altersgerechten, sterilen, frisch abgetöteten adulten C. elegans-Würmern mit permeabilisierter Nagelhaut, die in Puffer suspendiert sind.
Diese Würmer sind in ihrem Darmtrakt mit Bakterien infiziert.
Nehmen Sie eine Deep-Well-Platte mit Schleifpartikeln in Puffer und geben Sie einen einzelnen Wurm in jede Vertiefung.
Decken Sie die Platte mit Siegelfolie und einem Deckel ab.
Inkubieren Sie die Platte bei niedriger Temperatur, um eine Überhitzung während des Gewebeaufschlusses zu vermeiden.
Drücken Sie auf den Deckel, um die Vertiefungen zu verschließen.
Schütteln Sie die Platte mit einem Gewebedisruptor mechanisch. Die Schleifpartikel zerstören das Wurmgewebe und setzen Darmbakterien frei.
Klopfen Sie auf die Platte und zentrifugieren Sie sie, um den Inhalt zu pelletieren.
Mischen Sie den Inhalt, um die Bakterien gleichmäßig zu verteilen, und geben Sie sie dann in frische Vertiefungen.
Verdünnen Sie die Bakteriensuspension seriell in Puffer.
Die Verdünnungen auf Agarplatten auftragen und inkubieren, um die Koloniebildung zu ermöglichen.
Zählen Sie die Kolonien, um die Variation der Darmbakterienlast bei einzelnen Würmern zu quantifizieren.
Um sich auf den mechanischen Aufschlu
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