Isolierung von Endosporen aus einer Umweltprobe durch gezielte Lyse vegetativer Zellen
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Mikrobiologie
0 Aufrufe • 4:11 Min. • November 28th, 2025
Nehmen Sie eine Umweltprobe mit vegetativen Zellen und Endosporen eines endosporenbildenden Bakteriums sowie anderer Bakterien.
Endosporen besitzen eine schützende Hülle, die ihnen hilft, unter widrigen Bedingungen zu überleben.
Mit einer Vakuumfiltrationseinheit wird die Probe gefiltert, um die Zellen und Endosporen auf einer Membran einzuschließen.
Legen Sie die Membran in eine Schale und schneiden Sie sie in kleine Stücke.
Die Stücke in ein Rohr überführen, einen Puffer hinzufügen und das Rohr bewegen, um die Zellen und Endosporen freizusetzen.
Inkubieren Sie mit Bewegung bei hoher Temperatur, um die vegetativen Zellstrukturen zu schwächen, ohne die Endosporen zu schädigen.
Die Probe abkühlen, dann Lysozym hinzufügen und mit Rührung inkubieren. Lysozym stört die Zellwand der vegetativen Zellen, wodurch diese platzen.
Fügen Sie Natriumhydroxid und ein Reinigungsmittel hinzu und inkubieren Sie, um die zellulären Makromoleküle und Ablagerungen abzubauen, während die widerstandsfähigen Endosporen erhalten bleiben.
Filtern Sie die Probe, um die Endosporen zu isolieren. Waschen Sie die Endosporen, um überschüssige Reagenzien zu entfernen, und bereiten Sie sie für weitere Analysen vor.
Sobald d
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