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Mikrobiologie
0 Aufrufe • 1:59 Min. • November 28th, 2025
Beginnen Sie mit Übernachtkulturen von Vibrio-cholerae-Stämmen , pathogenen Bakterien, die in einem nährstoffreichen Medium gezüchtet werden.
Zentrifugiere die Kulturen, um die Zellen zu pelletieren. Entfernen Sie das Supernatant mit extrazellulären Verbindungen und lassen Sie das Pellet in Kochsalzlösung wieder suspendieren.
Als Nächstes tauchen Sie einen sterilen Drahtinokulator in die Kultur und stoßen ihn vertikal in den Motilitätsagar, um die Bakterien ohne laterale Ausbreitung unter der Oberfläche abzusetzen.
Flammensterilisieren Sie den Inokulator zwischen den einzelnen Stämmen, um Kreuzkontaminationen zu verhindern.
Inkubieren Sie die Platte, damit die Bakterien durch den Motilitätsagar wandern können.
Der Agar enthält Triphenyltetrazoliumchlorid, oder TTC, einen Redoxindikator, der bei der Reduktion durch metabolisch aktive Zellen rot wird.
Bewegliche Stämme reduzieren die TTC über ein großes Gebiet hinweg und bilden eine große rote Zone, während nicht-bewegliche Stämme Verfärbungen aufweisen, die auf die Stab-Linie beschränkt sind.
Die Größe und Ausbreitung der roten Zonen zeigen die Beweglichkeit jedes Stamms an.
Waschen Sie das Zellpellet, das aus der Übernachtkultur gewonnen wurde. Inokulieren Sie Motilitätsagarplatten, indem Sie eine Inokulationsstabbe in die gewaschene Flüssigkeitskultur einsetzen und vertikal in das Medium stecken.
Stellen Sie sicher, dass der Impfstich beim Stechen des Agar nicht verbiegt. Zwischen jeder Impfung sterilisieren Sie den Drahtsteller mit einem Bunsenbrenner. Inkubieren Sie die Platten mit der Deckelseite nach oben für 14–24 Stunden bei 37 Grad Celsius.
Nach 14 Stunden sollten die Beweglichkeitsplatten genau überwacht werden, um ein Überwuchern der Kulturen zu verhindern.