Selektive Anreicherung und Isolierung ölabbauender Meeresbakterien aus Meerwasserproben

Beginnen Sie mit einer Meerwasserprobe, die verschiedene mikrobielle Gemeinschaften enthält, darunter Bakterien, die in der Lage sind, Kohlenwasserstoffe abzubauen.

Führen Sie serielle Verdünnungen der Probe in Kochsalzlösung durch, um die mikrobielle Dichte zu reduzieren.

Fügen Sie Rohöl dem sterilen destillierten Wasser hinzu und rühren Sie das Gemisch, um die Kohlenwasserstoffbestandteile des Öls teilweise zu lösen.

Lassen Sie die Mischung absinken und trennen Sie sie in wasserlösliche und wasser-unlösliche Ölfraktionen.

Bereiten Sie selektive Agarplatten vor, wobei jede Ölfraktion als einzige Kohlenstoffquelle dient, um Bakterien anzureichern, die lösliche oder hydrophobe Kohlenwasserstoffe abbauen.

Die verdünnten Meerwasserproben werden auf das selektive Medium gelegt und bei Umgebungstemperatur inkubiert.

Kolonien, die entstehen, sind auf Enzyme wie Hydroxylasen und Dioxygenasen angewiesen, um Kohlenwasserstoffe zu metabolisieren.

Wählen Sie morphologisch unterschiedliche Kolonien aus und legen Sie sie auf frisches Material mit derselben Ölfraktion um, um reine Kulturen von kohlenwasserstoffabbauenden Bakterien zu erhalten.

Diese Methode ermöglicht die selektive Isolierung von ölabba