Verfolgung des Bakterienwachstums bei Einzelzellauflösung in einem mikrofluidischen System

Beginnen Sie mit einem mikrofluidischen Gerät, das auf der Stufe eines invertierten Fluoreszenzmikroskops montiert ist.

Das Gerät besteht aus einem Polymerchip mit horizontalen Zuführungskanälen. Jeder Kanal ist mit einer Reihe schmaler Gräben ausgekleidet, die an einem Ende versiegelt sind und so gestaltet sind, dass sie Bakterienzellen in linearen Ketten einschließen.

In den Gräben befinden sich nicht bewegliche bakterielle Zellen, die ein fluoreszierendes Protein ausdrücken und so ihre Visualisierung ermöglichen.

Jeder Zuführkanal ist mit Spritzenpumpen verbunden, die nährstoffreiches Medium mit kontrollierter Durchflussrate liefern.

Initiieren Sie den Fluss, damit das Medium in die Gräben diffundiert und das Bakterienwachstum unterstützt.

Eingeschlossene Bakterienzellen teilen sich im Graben und bilden eine Nachkommenkette.

Das Grabendesign sorgt dafür, dass neuere Zellen am offenen Ende weggespült werden, was eine langfristige Verfolgung der ältesten Zellen ermöglicht.

Nehmen Sie Bilder von Gräben im Laufe der Zeit auf, um das Wachstum und die Teilung einzelner Bakterienzellen zu verfolgen.

Befestigen Sie das geladene Gerät vorsichtig auf einen Bühneneinsatz, indem Sie das Deckglas an