In vitro Batch-Culture-Modell zur Nachahmung der Colon-Fermentation durch die menschliche Darmmikrobiota

Beginnen Sie mit einem Rohr, das in eine anaerobe Kammer gelegt wird und ein nährstoffreiches Medium und eine vorhydrierte, fermentierbare Faser enthält.

Die sauerstoffarmen Bedingungen im Inneren der Röhre ahmen die anaerbe Umgebung des menschlichen Dickdarms nach.

Anschließend geben Sie eine verdünnte, homogenisierte Kotprobe mit Darmmikroben in die Röhre und inkubieren Sie sie.

Wenden Sie das Rohr regelmäßig um, um die Mikroben mit der Faser zu vermischen.

Während der Inkubation metabolisieren und fermentieren die Mikroben anaerob und fermentieren die Fasern, wodurch kurzkettige Fettsäuren und andere Metaboliten entstehen und der pH-Wert des Mediums gesenkt wird.

Sammeln Sie in regelmäßigen Abständen Aliquots aus der Fermentationsmischung, um die Produktion von Metaboliten zu überwachen und ihren pH-Wert zu überprüfen.

Zentrifugieren Sie die Aliquots bei niedrigen Temperaturen, um die mikrobielle Biomasse in ein Pellet zu trennen.

Übertragen Sie das Supernatant mit den Metaboliten und kurzkettigen Fettsäuren in ein frisches Röhrchen.

Sowohl die mikrobielle Biomasse als auch das Supernatant in flüssigem Stickstoff einfrieren.

Schließlich werden die Proben bei niedriger Temperatur für weit