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Mikrobiologie
0 Aufrufe • 4:02 Min. • February 2nd, 2026
Nehmen wir die gesamte RNA, die aus einem mit pathogenen Bakterien infizierten Maushirn extrahiert wurde. Der Extrakt enthält Transkripte von infektionsempfindlichen Genen.
Fügen Sie ein DNA-abbauendes Enzym hinzu und inkubieren Sie, um restliche genomische DNA abzubauen.
Fügen Sie eine Mastermischung hinzu, die Reverse-Transkriptase-(RT)-Enzym, Nukleotide und unspezifische Primer enthält.
Inkubieren, um komplementäre DNA (cDNA) zu synthetisieren.
Führe eine hohe Temperatur ein, um das RT-Enzym zu inaktivieren.
Nehmen Sie eine Mastermischung, die DNA-Polymerase, Nukleotide, einen doppelsträngigen DNA-bindenden Farbstoff und Primer enthält, die spezifisch für ein Zielgen sind.
Gib die cDNA hinzu und wende Hitze an, um die DNA zu denaturieren.
Der Primer bindet an die Ziel-cDNA und ermöglicht so die Synthese neuer DNA-Stränge.
Der Zyklus wird wiederholt, um das Zielgen zu amplifizieren.
Der Farbstoff bindet an die amplifizierte DNA und strahlt Fluoreszenz aus, die am Ende jedes Zyklus aufgezeichnet wird.
Ein Anstieg der Fluoreszenz bestätigt die Expression des infektionsresponsiven Gens im infizierten Maushirn.
Infizieren Sie alle Mäuse mit planktonischen Zellen oder Biofilm-Zustandszellen und
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