JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Mikrobiologie
0 Aufrufe • 4:46 Min. • January 30th, 2026
Nehmen Sie einen Maus-Zahnfleischabschnitt, der mit pathogenen Bakterien infiziert ist und vorbehandelt wird, um auf bakterielle DNA zuzugreifen.
Legen Sie einen Puffer mit einer digoxigenin-markierten DNA-Sonde auf, die auf bakterielle DNA abzielt.
Legen Sie einen Überdeckzettel an und versiegeln Sie, um eine Enttrocknung der Probe zu verhindern.
Wärme einführen, um die DNA zu denaturieren, und dann unter heißen und feuchten Bedingungen inkubieren, um eine Sondenhybridisierung zu ermöglichen.
Kühlen Sie den Schlitten und entfernen Sie den Deckmantel und waschen Sie mehrmals mit Puffer, um ungebundene Sonden zu entfernen.
Fügen Sie eine Blockierungslösung hinzu, um eine unspezifische Antikörperbindung zu verhindern.
Inkubieren Sie mit enzymkonjugierten Antikörpern, die an das Digoxigenin binden.
Wasch, um ungebundene Antikörper zu entfernen.
Fügen Sie einen Inhibitor hinzu, um das endogene Enzym selektiv zu inaktivieren.
Trage ein Substrat auf, das mit dem Enzym reagiert, um einen gefärbten Niederschlag zu erzeugen.
Spülen Sie mit Wasser ab, um überschüssiges Substrat zu entfernen.
Fügen Sie einen Farbstoff hinzu, um die Kerne zu färben.
Waschen, um überschüssige Farbe zu entfernen.
In Ethanol
Sehen Sie sich das vollständige Transkript an und erhalten Sie Zugang zu Tausenden wissenschaftlicher Videos