Intraperitoneale Injektion von bakteriellem Lipopolysaccharid bei Mäusen zur Untersuchung systemischer Immunantworten

Beginne mit einer wachen Maus, die begrenzt ist, um ihre Bewegung zu begrenzen.

Neigen Sie den Kopf nach unten, um den Unterbauch freizulegen.

Lokalisieren Sie die Mittellinie des Bauches und identifizieren Sie eine leicht versetzte Injektionsstelle, um innere Organe zu vermeiden.

Als Nächstes nehmen Sie eine Spritze, die eine Lösung aus Lipopolysacchariden enthält, einem Bestandteil der gramnegativen bakteriellen Zellhülle.

Führe die Nadel in die Stelle ein, um Zugang zur Peritonealhöhle zu erhalten, und spritze die Lösung.

Nach der Injektion gelangt LPS in den systemischen Kreislauf und löst eine Immunreaktion aus.

Im Blutkreislauf bindet LPS an ein LPS-bindendes Protein, das es dann an CD14, ein Membranprotein auf Immunzellen, überträgt.

CD14 liefert LPS an MD-2 ab, ein Glykoprotein, das mit dem Toll-ähnlichen Rezeptor 4 (TLR4) assoziiert ist und so die TLR4-Dimerisierung ermöglicht.

Dimerisiertes TLR4 rekrutiert Adaptorproteine, die nachgelagerte Signalwege aktivieren und so proinflammatoriske Zytokinexpression und systemische Entzündungen induzieren.

Dies modelliert mikrobielle Translokation und systemische Immunaktivierung im Darm und anderen Organen, die durch bakterielle Produkte verursacht werden.

Führe die Maus sanft, aber bestimmt und halte das Tier mit einer Hand fest. Stellen Sie sicher, dass die Maus sicher gehalten wird und normal atmen kann.

Neigen Sie die Mausnase leicht zum Boden, um den Bauch für die Injektion freizulegen. Lokalisieren Sie die Mittellinie des Bauches und injizieren Sie das benötigte LPS-Volumen auf der unteren linken oder rechten Seite.

Es ist sehr wichtig, sicherzustellen, dass die Nadel in die Peritonealhöhle gelangt, um Fehlinjektionen zu vermeiden.

Die Nadel sollte außerdem nicht zu tief in die Bauchhöhle eindringen, um Verletzungen der inneren Organe zu vermeiden.

Bringen Sie das Tier vorsichtig zurück in den Haus-Käfig.

Überwachen Sie die Mäuse auf das Auftreten und die Schwere der Endotoxämie zum Zeitpunkt der Injektion und alle zwei Stunden danach für 8 Stunden. Halten Sie die Beobachtungen im beigefügten Ergebnisblatt fest.