Untersuchung der mikrobiellen Aktivität des menschlichen Darms an Exopolysaccharide

Beginnen Sie mit dem Supernatant, das während der In-vitro-Fermentation von Exopolysacchariden vom menschlichen Darmmikrobiom produziert wird. Der Supernatant enthält deprotonierte kurzkettige Fettsäuren (SCFAs) und andere Metaboliten.

Fügen Sie Metaphosphorsäure hinzu, um den pH-Wert des Supernatanten zu senken, und Wirbel, um gründlich zu vermischen. Dies wandelt SCFAs in ihre protonierten Formen um, die für die Gaschromatographie geeignet sind.

Zentrifugieren, um Ablagerungen zu trennen und das Supernatant zu sammeln, das SCFAs und andere Metaboliten enthält.

Filtern Sie das Überstandsmittel, um Restreste zu entfernen und Störungen mit der Chromatographie zu vermeiden.

In einem Hochleistungsgaschromatographiesystem wird das Überleitungsmittel in den erhitzten Einlass injiziert, um ihn zu verdampfen. Anschließend mischt man den Dampf mit einem Inertgas und leitet ihn durch eine polare stationäre Phasensäule zur Trennung.

SCFAs interagieren mit der stationären Phase der Säule und trennen sich je nach Flüchtigkeit, wobei kürzere Säuren früher eluieren als längere.

Identifizieren Sie die Konzentrationen verschiedener SCFAs, indem Sie die Ergebnisse mit internen Standards vergleichen. Dies