JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Mikrobiologie
0 Aufrufe • 6:21 Min. • March 31st, 2026
Beginnen Sie mit einem nährstoffreichen Agarose-Pad auf einem Metallrahmen, der Bakterien enthält, die fluoreszierend markierte Chromosomen-Ursprünge und fluoreszierende Mikrosphären zeigen.
Das Agarose-Pad unterstützt die bakterielle Bindung und Beweglichkeit, und fluoreszierende Mikrosphären dienen als Referenz zur Verfolgung der Chromosomensegregation.
Fügen Sie dem Objektivobjektiv in der vorgeheizten Inkubationskammer eines umgekehrten Weitfeldmikroskops Tauchöl hinzu.
Lege die Probe über die Linse und fokussiere dich dann auf einen Bereich mit mehreren Bakterien und mindestens einer fluoreszierenden Mikrosphäre.
Starten Sie Zeitrafferaufnahmen und nehmen Sie sowohl Phasenkontrast- als auch Fluoreszenzbilder auf.
Der fluoreszenzmarkierte Ursprung der Replikation erscheint als heller Haufen nahe einem Ende der Zelle.
Während der Teilung dupliziert sich der Ursprung; ein Cluster bleibt am ursprünglichen Ende, während der andere Cluster zum neu entstandenen Zellende migriert.
Dieses Setup ermöglicht die Nachverfolgung der Chromosomensegregation über mehrere Teilungen hinweg und kann angepasst werden, um ähnliche dynamische Prozesse bei anderen Bakterien, einschließlich pathogener Spezie
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