JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Mikrobiologie
0 Aufrufe • 3:48 Min. • February 26th, 2026
Beginnen Sie mit einem erwachsenen Zebrafisch, der mit einem antibiotikaresistenten Stamm von Vibrio cholerae infiziert ist. Dieses pathogene Bakterium exprimiert β-Galactosidase-Enzym und besiedelt den Darmtrakt.
Sammeln Sie den Fisch und geben Sie ihn in eine Lösung mit einer Überdosis Narkose, um ihn einzuschläfern.
Legen Sie den Fisch mit der Bauchseite nach oben und sichern Sie ihn mit Nadeln.
Desinfizieren Sie den Bauch, machen Sie einen längsverlaufenden Hautschnitt und zwei seitliche Einschnitte zum Kopf hin und stecken Sie dann die Haut an, um den Darmtrakt freizulegen.
Übertragen Sie den Trakt in ein Homogenisierungsrohr, das einen Kaltpuffer mit Glasperlen enthält.
Inkubieren Sie mit Bewegung, sodass die Glasperlen das Gewebe stören und die Bakterien freisetzen.
Das Homogenat in Serie verdünnen, auf das Medium verplatten und inkubieren. Das Medium enthält ein chromogenes β-Galactosidase-Substrat und ein Antibiotikum zur Beseitigung von Schadstoffen.
Die Bakterien exprimieren β-Galactosidase-Enzym, das das chromogene Substrat hydrolysiert und zur Bildung blaupigmentierter Kolonien führt.
Zählen Sie die Kolonien, um die bakterielle Darmlast abzuschätzen.
Wenn das Experiment seinen
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