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Mikrobiologie
0 Aufrufe • 2:30 Min. • February 26th, 2026
Setzen Sie erwachsene Zebrafische in steriles Infektionswasser und fügen Sie einen pathogenen Vibrio-cholerae-Stamm mit der gewünschten Dichte hinzu.
Decken Sie den Becher mit einem perforierten Deckel ab, damit der Fisch nicht herausspringt, und brüten Sie ihn aus.
Die Zebrafische nehmen die Bakterien auf, die den Darm erreichen, durch die Schleimschicht mit ihren Flagellen vordringen und am Epithel haften.
Sie besiedeln das Epithel und sondern Toxine ab, die die Darmintegrität stören, was zum Austritt von Ionen, Flüssigkeiten und Proteinen führt.
Die Toxine lösen außerdem die Sekretion von Epithelschleim aus und fördern so die bakterielle Persistenz.
Die Ansammlung von Flüssigkeit, Schleim und Darminhalt führt zu wässrigem Durchfall, der durch erhöhte Wassertrübung nachweisbar ist.
Nach der Inkubation sammeln Sie die Fische und entsorgen Sie das infizierte Wasser in ein Desinfektionsmittel.
Bringen Sie die Fische in steriles Wasser, um Oberflächenbakterien zu entfernen.
Sammeln Sie die Fische und bringen Sie sie erneut in steriles Wasser für weitere Analysen.
Nach der Vorbereitung der V.cholerae-Kulturen impfen Sie den Zebrafisch durch Eintauchen. Zuerst geben Sie vier oder fünf Zebrafische in einen 400-Milliliter-Becher mit 200 Millilitern sterilem Infektionswasser. Dann geben Sie 1 Milliliter V.cholerae-Kultur hinzu, um die gewünschte Infektionskonzentration zu erhalten.
Dann wird das Becherglas mit einem perforierten Deckel abgedeckt. Nachdem Sie alle Becher vorbereitet haben, bringen Sie sie in einen Glasfront-Inkubator mit 28 Grad Celsius. Für eine vorübergehende Exposition gießt man nach etwa sechs Stunden das Becherwasser durch ein Fischernetz, um die Fische aufzufangen. Das infizierte Wasser muss in Bleichmittel entsorgt werden, um die Bakterien abzutöten.
Dann geben Sie den Fisch fünf Minuten lang in 200 Milliliter steriles Infektionswasser. Nach fünf Minuten lässt man das Wasser durch ein Netz laufen und entsorgt das Wasser in Bleichmittel. Jetzt können die Fische in einen neuen sauberen Becher mit 200 Millilitern sterilem Infektionswasser gehen.