Herstellung von Gardnerella vaginalis Inoculum zur Modellierung wiederkehrender Harnwegsinfektionen bei Mäusen

Nehmen Sie einen antibiotikaresistenten Stamm von G. vaginalis auf, einem anaeroben Bakterium, das mit Harnwegsinfektionen bei Mäusen assoziiert wird.

Während einer ersten Blaseninfektion bildet uropathogene E. coli Ruhereservoirs in den Blasenepithelzellen.

Die anschließende Exposition gegenüber G. vaginalis löst durch Toxine eine Abscheidung oberflächlicher Zellen aus, wodurch ruhende UPEC wieder auftauchen und wiederkehrende Harnwegsinfektionen verursachen können.

Zur Herstellung des G. vaginalis inoculum streicht man den Bestand ohne Antibiotika auf eine Nähragarplatte, um die bakterielle Erholung zu ermöglichen.

Anaerob inkubieren, um aktiv wachsende Kolonien zu erhalten.

Übertragen Sie eine Runde dichter Kolonien in antibiotikafreie Nährbrühe.

Statisch unter anaeroben Bedingungen inkubieren, bis die gewünschte Bakterienkonzentration erreicht ist.

Messen Sie die optische Dichte, um die Konzentration zu schätzen.

Übertragen Sie die Suspension in ein Rohr, zentrifugieren Sie die Bakterien, um die Bakterien zu pelletieren, entsorgen Sie den Supernatant und suspendieren Sie sie erneut in einem Puffer.

Stellen Sie serielle Verdünnungen vor und beschichten Sie sie auf antibiotikahaltigen Med