JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Mikrobiologie
0 Aufrufe • 2:04 Min. • February 26th, 2026
Beginnen Sie mit einer Multiwell-Platte, die ein kollagenbeschichtetes Bohrloch-Insert enthält.
Füge dem Brunnen ein Ausdehnungsmedium hinzu.
Die Nährstoffe im Medium fördern die Zellproliferation, während die Differenzierungsinhibitoren einen stammartigen Zustand aufrechterhalten.
Fügen Sie eine Suspension von Epithelzellclustern, die aus Darmstammzellkulturen gewonnen wurden, zum Bohrloch-Einsatz hinzu und inkubieren.
Die Zellen haften an der kollagenbeschichteten Oberfläche und erhalten Nährstoffe sowohl aus dem oberen als auch aus dem unteren Kompartiment.
Die Inhibitoren verhindern die Zelldifferenzierung und fördern die Vermehrung der Zellcluster.
Mit einem Phasenkontrastmikroskop beobachten Sie die Kultur.
Sobald die Monoschicht gebildet ist, wird das Kulturmedium durch ein frisches Medium ohne zellinterne Differenzierungshemmer ersetzt.
Dies erleichtert die Differenzierung der Zellen zu reifen Kolonepithelzellen mit engen Übergängen.
Diese Zellen sezernieren Schleim und entwickeln eine funktionelle Monoschicht, die die physiologische Darmbarriere für Wirts-Pathogen-Interaktionsstudien nachahmt.
Pipettieren Sie 600 Mikroliter Expansionsmedium in den Raum unter jedem Einsatz. Pipettier
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