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Mikrobiologie
0 Aufrufe • 4:02 Min. • February 26th, 2026
Nehmen Sie ein Medien, das ein Antibiotikum zur Zellteilung blockiert.
Inokulieren Sie es mit stabförmigen, gramnegativen Bakterien.
Inkubieren Sie mit Zittern.
In Gegenwart des Antibiotikums wachsen die Bakterien weiter, ohne sich zu teilen, und bilden lange Filamente.
Sammeln Sie die Kultur und zentrifugieren Sie sie bei niedriger Temperatur. Entsorge das Überdachte und wasche die Filamente mit einer Saccharoselösung, um Lyse zu verhindern.
Verwerfen Sie die Saccharoselösung.
Füge einen Puffer hinzu, gefolgt von Enzymen und EDTA. EDTA schwächt die äußere Membran, sodass Lysozym in die Peptidoglykan-Schicht eindringen und sie abbauen kann.
Dies entfernt die Zellwand, sodass die bakterielle Zelle schrumpfen kann. DNase I bricht die freigesetzte chromosomale DNA aus den Zellen ab und verhindert das Klumpen von Zellen.
Fügen Sie eine hypotonische Lösung mit sanftem Wirbel hinzu, sodass die Zelle Wasser aufnehmen kann.
Die flexiblen Membranen ermöglichen es der Zelle, eine kugelförmige Form anzunehmen, die als Spheroplast bezeichnet wird.
Übertragen Sie einen Aliquot mit den Spheroplasten in zwei Röhren mit einer gekühlten isotonen Lösung, um die Spheroplasten zu stabilisieren.
Um gramnegative E
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