JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Mikrobiologie
0 Aufrufe • 3:41 Min. • February 26th, 2026
Nehmen Sie eine Suspension von pathogenen Bakterien.
Fügen Sie die Suspension einer angehefteten Kultur von Knochenmark-abgeleiteten Makrophagen oder BMDM-Zellen hinzu und inkubieren Sie.
Die Bakterien nutzen ihre Oberflächenproteine, um an Wirtszellrezeptoren zu binden und so die Haftung zu fördern.
Spüle mit einem Puffer, um nicht haftende Bakterien zu entfernen.
Fügen Sie frisches Medium hinzu und inkubieren Sie.
Die anhaftenden Bakterien werden dann von der Wirtszelle internalisiert.
Fügen Sie ein Antibiotikum hinzu, um nicht internalisierte Bakterien abzutöten.
Entsorgen Sie das Medium und waschen Sie mit Puffer.
Fügen Sie gekühltes Wasser hinzu, um die Wirtszelle zu lysieren, wodurch Zellinhalt, der Zellkern und die internalisierten Bakterien freigesetzt werden.
Sammeln Sie das Zelllysat und zentrifugieren Sie, um zelluläre Ablagerungen auszufällen.
Sammle das Supernatant, das die Bakterien enthält. Führen Sie es durch ein Filtergerät, um intakte Bakterien einzufangen.
Falten Sie das Filterpapier und legen Sie es in ein Rohr.
Schnellgefrieren in flüssigem Stickstoff, um die zelluläre Integrität zu erhalten.
Lagern Sie unter kalten Bedingungen für den weiteren Gebrauch.
Mit 0,5 Millilitern
Sehen Sie sich das vollständige Transkript an und erhalten Sie Zugang zu Tausenden wissenschaftlicher Videos