Etablierung eines Mausmodells von Brandinfektionen mit pathogenen Bakterien

Beginnen Sie mit einer betäubten Maus mit rasiertem Rücken.

Positioniere die Maus mit einem Petrischalendeckel unter ihrem Bauch, um den Rücken waagerecht zu halten.

Tauchen Sie einen Messingblock in einen Becher mit kochendem Wasser, bis er erhitzt ist.

Geben Sie in der Zwischenzeit ein Schmerzmittel mittels subkutaner Injektion.

Dann drückst du den erhitzten Messingblock auf den rasierten Rücken der Maus.

Die Hitze schädigt die äußerste Hautschicht, die Epidermis, und breitet sich auf das darunterliegende Gewebe aus, wodurch eine Brandwunde entsteht.

Entfernen Sie den Block und spritzen Sie Kochsalzlösung subkutan, um Dehydrierung zu verhindern.

Anschließend wird ein Inokulum mit pathogenen Bakterien aufgetragen, die in einem Puffer suspendiert sind.

Verwenden Sie einen sterilen Wattestäbchen, um die Bakterien gleichmäßig über die Wunde zu verteilen.

Die Bakterien heften sich mit Oberflächenproteinen an die Zellrezeptoren, beginnen mit der Besiedlung, bilden einen schützenden Biofilm und bilden eine lokale Infektion.

Dieses Mausmodell der Brandinfektion ist bereit für Studien zur Wirts-Pathogen-Interaktion.

Nach der Betäubung der Maus solltest du laut Textprotokoll einen 50-Klingen-Haarschneider verwenden, um die Maus auf dem Rücken zu rasieren und so viel Haut wie möglich freizulegen. Dann wird der Deckel einer 35-Millimeter-Petrischale unter den Mäusebauch gelegt, um den Rücken relativ horizontal zu halten.

Verwenden Sie eine 10 Zoll mal 10 Zoll große 220 VAC Heizplatte, um Wasser in einem 150-Milliliter-Becher zu kochen. Tauchen Sie einen Messingblock in den Becher, bis das thermische Gleichgewicht mit dem Wasser erreicht ist. Vor der Entstehung der Brandverletzung verabreichen Sie eine subkutane Injektion mit präventiven Schmerzmitteln zur Schmerzlinderung.

Zehn Minuten später, während du Thermohandschuhe trägst, drücke den erhitzten Messingblock vorsichtig auf die rasierte Stelle auf dem Rücken der Maus für sieben Sekunden, um Brandwunden zu verursachen. Verabreichen Sie 0,5 Milliliter sterile Kochsalzlösung durch subkutane Injektionen. Fünf Minuten nach der Einleitung der thermischen Verletzung verwenden Sie eine Pipette, um 50 Mikroliter bakterielle Suspension mit 5 mal 10 bis zur sechsten CFU in PBS auf die Mausverbrennungen zu impfen.

Anschließend wird durch das Bewegen eines sterilen Wattestäbchens in einer Zickzackbewegung auf die Haut das Aliquot auf die Verbrennungen verteilt, um die bakteriellen Zellen im verbrannten Bereich so gleichmäßig wie möglich zu verteilen.