JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Mikrobiologie
0 Aufrufe • 2:40 Min. • March 31st, 2026
Beginnen Sie mit einer betäubten Maus mit einem Petrischalendeckel unter dem Bauch, um den Rücken waagerecht zu halten.
Die Maus zeigt eine Brandwunde am Rücken, die mit Acinetobacter baumannii, einem gramnegativen bakteriellen Erreger, infiziert wurde.
Die Bakterien sind genetisch so verändert, dass sie ein Biolumineszenz-Operon tragen.
Positionieren Sie die Maus in einer Biolumineszenz-Bildkammer, die bei optimaler Temperatur gehalten wird, und beginnen Sie mit der Bildnahme.
An der Infektionsstelle codieren die LuxA- und LuxB-Gene des Biolumineszenz-Operons für das Luciferase-Enzym. Die luxCDE-Gene codieren für Enzyme, die das Luciferase-Substrat synthetisieren.
Luciferase katalysiert die Oxidation des Substrats und erzeugt sichtbares Licht, wodurch die Bakterien leuchtend werden.
Das Biolumineszenzsignal zeigt das Vorhandensein metabolisch aktiver Bakterien an der Wundstelle an.
Mit Bildgebungssoftware quantifizieren Sie die Intensität des Biolumineszenzsignals, um die lebensfähige Bakterienlast abzuschätzen.
Unmittelbar nach der Impfung führen Sie eine Biolumineszenzbildgebung durch, indem Sie die Live-Bildgebungssoftware starten. Im Bedienfeld klicken Sie auf Initialisieren. Dann war
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