JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Mikrobiologie
0 Aufrufe • 2:15 Min. • March 31st, 2026
Beginnen Sie mit Maissetzlingen, die unter kontrollierten Bedingungen wachsen, um als Wirt zu dienen.
Als Nächstes nehmen Sie Agrobacterium tumefaciens, ein pflanzenpathogenes Bakterium.
Die manipulierten Bakterien tragen ein T-DNA-Konstrukt, das ein rekombinantes virales Genom codiert. Dieses Genom enthält ein eingefügtes Genfragment, das dazu dient, ein Ziel-Mais-Gen zum Schweigen zu bringen.
Injizieren Sie die Bakterien direkt über dem Coleoptilarknoten, dem untersten Knoten der Pflanze, bis die Suspension das Coleoptil füllt und so die Lieferung ins innere Gewebe gewährleistet.
An der Injektionsstelle übertragen die Bakterien die T-DNA, die das virale Genom transportiert, in Maiszellen, wo sie in virale RNA transkribiert wird, die in das Zytoplasma übergeht.
Die RNA repliziert und löst die Produktion viraler Proteine aus, wodurch neue virale Partikel entstehen, die sich systemisch ausbreiten und eine Infektion etablieren.
Die virale RNA, die das gewünschte Genfragment transportiert, aktiviert die RNA-Interferenzmaschinerie der Pflanze, baut spezifische Mais-mRNAs ab und verstummt das Zielgen.
Dies führt zu sichtbaren Veränderungen der Phänotypen, die vom Zielgen reguliert werden, währ
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