Etablierung von bakteriellen und pilzreichübergreifenden Biofilmen zur Untersuchung oraler Pathogenese

Beginnen Sie mit Kulturen von Streptococcus mutans, einem oralen pathogenen Bakterium, und Candida albicans, einem opportunistischen Pilzpathogen.

Übertragen Sie isolierte Kolonien in ein nährstoffreiches Medium und brüten sie über Nacht aus, um aktives Wachstum sicherzustellen.

Zentrifugere, um die Zellen zu pelletieren. Entfernen Sie das Obermaterial und lassen Sie die Zellen in steriler Kochsalzlösung auf eine definierte Konzentration zurück.

Nehmen Sie eine Mehrfachbrunnenplatte, die mit menschlicher Speichellösung beschichtet ist, um die orale Umgebung nachzuahmen.

Fügen Sie C. albicans hinzu und inkubieren Sie, um eine Haftung an der Speichelschicht zu ermöglichen. Waschen Sie mit steriler Kochsalzlösung, um nicht haftende Zellen zu entfernen.

Fügen Sie hitzeinaktiviertes Serum hinzu und inkubieren Sie, um die Hyphenentwicklung zu stimulieren. Waschen Sie überschüssiges Serum ab.

Führen Sie S. mutans ein, dann saccharosereiches Medium und inkubieren. S. mutans sezerniert Glucosyltransferase, die an C. albicans mannans bindet.

Dieses Enzym katalysiert Saccharose zu Glukanen auf der Pilzoberfläche, verankert Bakterien an Hyphen und fördert die Proliferation sowie die Bildung von Matri