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Mikrobiologie
0 Aufrufe • 2:33 Min. • February 26th, 2026
Beginnen Sie mit Platten, die an der Oberfläche angeheftete Bakterien und planktonische oder frei schwebende Bakterien enthalten.
Fügen Sie beiden Proben Amöbenzellen hinzu.
Lege ein Agarose-Pad mit Calcein-AM, einem zelldurchlässigen Farbstoff, über jede Probe.
Entferne überschüssige Flüssigkeit, lasse sie trocknen und brüte die Platten aus.
In der Platte mit oberflächengebundenen Bakterien reguliert der Oberflächenkontakt die Virulenzgene nach oben und exprimiert Toxine.
Diese Toxine stören die Amöbenmembran und verändern ihre Form.
Eine beschädigte Amöbenmembran ermöglicht es, mehr Calcein-AM in das Zytoplasma einzudringen, wo intrazelluläre Esterasen sie zu fluoreszierendem Calcein spalten, was zu seiner Ansammlung führt.
Im Gegensatz dazu bleiben planktonische Bakterien, denen Oberflächenkontakt fehlt, nicht virulent und bleiben die Amöbenmembranen intakt. Dies reduziert den Eintritt von Calcein-AM in die Amöbe und begrenzt die Ansammlung von fluoreszierendem Calcein.
Gesunde Amöben verschlingen auch die nicht-virulenten Bakterien.
Unter einem fluoreszierenden Mikroskop zeigen helle, abgerundete Amöbenzellen eine virulente bakterielle Wechselwirkung an, während schwache, amorphe Amöben
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