Bewertung der Inhibitoreffekte auf die Pellicle-Bildung bei Bacillus subtilis

Beginnen Sie mit einer Kultur von Bacillus subtilis, einem Bodenbakterium, das in einem nährstoffreichen Medium gezüchtet wird.

Zentrifugieren Sie, um die Bakterien zu pelletieren, den Überbeugstoff zu entsorgen und dann das Pellet in einem chemisch definierten Medium zu suspendieren, das die Biofilmbildung unterstützt.

Missen Sie die optische Dichte der Kultur, um die passende bakterielle Konzentration zu bestimmen.

Geben Sie die Kultur zu Brunnen, die ein definiertes Medium für die Kontrolle und ein definiertes Medium mit einem Inhibitor für den Test enthalten.

Inkubieren Sie unter statischen Bedingungen. Die Bakterien wandern nach oben und sammeln sich an der Luft-Flüssigkeit-Grenzfläche an, wo die erhöhte Sauerstoffverfügbarkeit das Bakterienwachstum unterstützt.

Im Kontrollfeld sondern Bakterien an der Grenzfläche extrazelluläre Matrixkomponenten ab und bilden einen schwebenden Biofilm, den sogenannten Pellicle, eine Schutzschicht, die das Überleben der Bakterien fördert.

Im Testbrunnen stört der Inhibitor die Matrixsynthese, was zu verstreuten Bakterienpopulationen führt.

Dieser Test zeigt, dass Inhibitoren die Bildung von Biofilmen blockieren, was ein zentrales Merkmal der bakterie