Ethanolresistenztest zur Bewertung der Integrität der Biofilmmatrix

Nehmen wir pathogene, bakterienbasierte Biofilme, die auf Nährstoffagar wachsen.

Der unbehandelte Biofilm enthält dicht gepackte Bakterien innerhalb einer schützenden extrazellulären Matrix.

Der mit Inhibitor behandelte Biofilm weist lose assoziierte Zellen innerhalb einer spärlichen Matrix auf.

Teile jeden Biofilm in zwei Teile, setzt dann eine Hälfte dem Puffer als Kontrolle aus, die andere dem Ethanol, um antimikrobiellen Stress auszuüben.

Im unbehandelten, ethanolexponierten Biofilm reduziert die dichte Matrix die Ethanoldiffusion und begrenzt die Zellpenetration, was zu weniger bakterieller Tötung führt.

Im inhibitorbehandelten, ethanolbesetzten Biofilm ermöglicht die spärliche Matrix dem Ethanol das Eindringen leichter, was zu einer stärkeren bakteriellen Tötung führt.

Zentrifugiere die Röhren und entferne das Überwasser. Fügen Sie Puffer und Sonikat hinzu, um die Zellen zu verteilen.

Plattieren Sie die verdünnten Suspensionen und inkubieren Sie, um das Wachstum lebensfähiger Bakterien zu ermöglichen.

Zähle koloniebildende Einheiten (CFUs); weniger CFUs aus dem inhibitorbehandelten, ethanolbesetzten Biofilm bestätigen, dass die Matrixintegrität für die Ethanolresistenz unerlässlich i