JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Mikrobiologie
0 Aufrufe • 2:59 Min. • March 31st, 2026
Beginnen Sie mit Mikroplattenbohrungen, die Biofilme eines pathogenen Bakteriums enthalten, unterteilt in vier experimentelle Gruppen.
Aspirieren Sie das Medium vorsichtig und spülen Sie mit einem Puffer ab, um nicht haftende Zellen zu entfernen.
Fügen Sie zwei Gruppen einen Puffer mit einem Photosensibilisierer-Vorläufer hinzu, während die übrigen beiden nur den Puffer erhalten.
Inkubieren Sie alle Gruppen im Dunkeln, damit der Vorläufer durch den Biofilm diffundiert, in die Bakterienzellen eindringt und in einen Photosensibilisator umgewandelt wird, der sich im Zytoplasma und in den Membranen ansammelt.
Nach der Inkubation wird eine vorläuferbehandelte Gruppe und eine reine Puffergruppe der Lichtbestrahlung ausgesetzt.
In der vorläuferbehandelten Gruppe regt das Licht den Photosensibilisierer an, der Energie an molekularen Sauerstoff umwandelt und reaktive Sauerstoffspezies (ROS) erzeugt.
Das ROS stört Membranen, baut Proteine ab und fragmentiert DNA, was zum bakteriellen Zelltod führt.
Die anderen drei Bedingungen erzeugen kein ROS, da entweder der Vorläufer oder das Licht fehlt und der Biofilm unbeeinträchtigt bleibt.
Um einen Biofilm in einer 96-Well-Platte zu erzeugen, impfen Sie zun
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