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Mikrobiologie
0 Aufrufe • 2:48 Min. • March 31st, 2026
Beginnen Sie mit rotem Fluorophor markiertem M. Tuberkulose-Antigene sind auf einem polymerbeschichteten Deckglitscher immobilisiert.
Füge einen Blockierungspuffer hinzu, um unspezifische Bindungsstellen zu blockieren. Waschen Sie, um überschüssigen Blocker zu entfernen.
Führen Sie das gesamte Protein ein, das aus menschlichen Makrophagen extrahiert wird, einschließlich des Zelloberflächenrezeptors von Interesse. Inkubieren.
Die Makrophagenrezeptoren binden an die immobilisierten bakteriellen Antigene.
Fügen Sie einen Quervernetzer hinzu, um die Rezeptor-Antigen-Komplexe zu stabilisieren, gefolgt von einem Abschrecker, um die nicht reagierten Quervernetzer zu neutralisieren.
Waschen Sie und fügen Sie einen zweiten Vernetzer hinzu, um die Komplexe zu verstärken.
Waschen Sie nochmal. Dann entferne ich den Deckmantel und kehre ihn über eine primäre Antikörperlösung um.
Die Antikörper binden an den interessierten Makrophagenrezeptor.
Waschen und invertieren Sie den Deckmantel über einer grünen, fluorophorkonjugierten sekundären Antikörperlösung, die an die primären Antikörper bindet.
Waschen und montieren Sie den Deckdeckel.
Visualisieren Sie die Probe unter einem Fluoreszenzmikroskop. Ko-lokali
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