JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Mikrobiologie
0 Aufrufe • 2:26 Min. • March 31st, 2026
Nehmen Sie eine betäubte Zebrafischlarve in der Rille eines Agarose-Schimmels. Ihr Kopf ist während der Injektion in einem Winkel nach oben positioniert, damit der Darm zugehörig ist.
Decken Sie sie mit niedrigschmelzender Agarose ab und lassen Sie die Agarose dann erstarren und die Larve immobilisieren.
Nehmen Sie eine Mikroinjektionsnadel mit pathogenen Bakterien, die in einer Tracer-Farbstofflösung suspendiert sind.
Unter einem Stereomikroskop wird die Nadel schräg positioniert und durch die Agarose in den Larvenmund geführt.
Führe es durch das Nahrungsrohr in den Darm.
Injizieren Sie die Bakterien in das Darmlumen und bestätigen Sie die Verabreichung mit dem Tracer-Farbstoff. Diese nicht-invasive Methode, genannt Mikrogavage, ahmt den natürlichen Infektionsweg nach.
Zieh die Nadel zurück. Schneide die Agarose und übertrage die Larve in ein frisches Medium.
Die Bakterien replizieren und setzen Toxine frei, die das Darmepithel schädigen und so die bakterielle Invasion und Besiedlung in tieferen Geweben fördern.
Das Zebrafisch-Infektionsmodell ist bereit zur Analyse.
Auf einer 1,5%-Agaroseplatte mit Rillen wird ein Tropfen mit 0,8 % niedrig schmelzender Agarose auf die Zebrafischlarven geg
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