JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Mikrobiologie
0 Aufrufe • 3:03 Min. • March 31st, 2026
Nehmen Sie eine Bakterienkultur, die Blattgewebe infizieren kann.
Kratze die Kolonien ab und lasse sie in einer Salzlösung aufhängen.
Messen Sie die optische Dichte, um die Bakterienkonzentration zu bestimmen, und verdünnen Sie dann auf den gewünschten OD.
Führen Sie serielle Verdünnungen durch, um die endgültige Inokulumkonzentration zu erreichen.
Fügen Sie ein Tensid hinzu, um die Oberflächenspannung zu verringern und eine gleichmäßige Ausbreitung der Bakterien auf dem Blatt sicherzustellen.
Übertragen Sie die Suspension in eine Petrischale.
Als Nächstes legen Sie zwei Holzstöcke über die Oberseite eines Arabidopsis-Topfs .
Drehen Sie die Pflanze über die Schale und tauchen Sie die Blätter in die Suspension.
Stelle das Setup in eine Vakuumkammer und führe einen Vakuumimpuls an
Das aufgebrachte Vakuum entfernt Luft aus dem Blattgewebe durch natürliche Öffnungen.
Das Freisetzen des Vakuums stellt den atmosphärischen Druck wieder her und zwingt Bakterien in die Blätter.
Wiederholen Sie die Impulse, um maximale Infiltration zu erreichen.
Nimm den Topf ab. Dann tupfen Sie das überschüssige Inokulum ab.
Die bakteriell infizierten Blätter von Arabidopsis sind bereit für eine nachgeschaltete Analyse.
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