JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Mikrobiologie
0 Aufrufe • 2:44 Min. • March 31st, 2026
Beginnen Sie mit einem Transwell-Einsatz, der eine Kokultur von Epithel- und kelchähnlichen Zellen enthält.
Epithelzellen bilden enge Verbindungen, während kelchähnliche Zellen Schleim produzieren, der die in-vivo in-vivo intestinale Epithelbarriere repliziert.
Nehmen Sie eine Suspension der oralen Bakteriengemeinschaft, die mit simulierter Darmflüssigkeit behandelt wurde, um die Verdauung des Dünndarms nachzuahmen.
Ersetzen Sie das Medium in der oberen Kammer durch die bakterielle Suspension.
Inkubieren Sie mit Schütteln, um die bakterielle Adhäsion und Internalisierung zu fördern.
Sammeln Sie das Medium aus der oberen Kammer mit nicht haftenden Bakterien für nachfolgende Viabilitätstests.
Fügen Sie eine schleimlösende Lösung hinzu und inkubieren Sie, um den Schleim aufzulösen und die haftenden Bakterien freizusetzen.
Sammeln Sie die Lösung für eine weitere Analyse der bakteriellen Lebensfähigkeit und Adhäsion.
Wasche die Zellen mit einem Puffer und gib ein Waschmittel dazu, um sie zu lösen.
Sammelt die Zellsuspension ein.
Wirbeln Sie die Suspension, um die Zellen zu lysieren und die internalisierten Bakterien freizusetzen.
Zentrifugieren und sammeln Sie den Überstandsstoff und zelluläre Abf
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