JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Mikrobiologie
0 Aufrufe • 3:24 Min. • August 31st, 2026
Nehmen Sie Röhrchen mit viralen Kapsiden, die virusähnliche Partikel ohne genetisches Material sind.
Erhitzen Sie die Röhrchen bei konstanter Temperatur für unterschiedliche Dauer.
Eine kürzere Heizdauer belastet die Kapsidproteine leicht, während eine verlängerte Erhitzung das Kapsid stört und zur Aggregation führt.
Kühlen Sie die Röhrchen schnell ab, um weitere strukturelle Veränderungen zu verhindern.
Übertragen Sie die Flüssigkeit auf eine Paraffinfolie.
Platzieren Sie ein Gitter für die Transmissions-Elektronenmikroskopie (TEM) auf den Tropfen. Die Kapside binden an die Oberfläche des Gitters.
Die Überstände mit einem Filterpapier abtupfen, um überschüssige Flüssigkeit zu entfernen.
Mit einem Puffer waschen, um locker gebundene Kapside zu entfernen, und das Gitter anschließend erneut abtupfen.
Einmal in Uranylacetat eintauchen, einen Schwermetall-Farbstoff, der an die Capsid-Oberfläche bindet und sie unter dem TEM dunkler erscheinen lässt.
Blottern Sie das Raster und legen Sie es auf eine Platte. Bewahren Sie die Platte in einem Exsikkator auf, um Feuchtigkeit zu entfernen.
Untersuchen Sie das Gitter mit TEM, um hitzeinduzierte Schäden an den Kapsiden sichtbar zu machen.
Führen Sie die W
Sehen Sie sich das vollständige Transkript an und erhalten Sie Zugang zu Tausenden wissenschaftlicher Videos