Reinigung von Viren aus der Allantoisflüssigkeit von bebrüteten Hühnereiern

Beginnen Sie mit einem Reservoir, das das aus virusinfizierten Hühnereiern gewonnene Allantoisfluid enthält.

Diese Flüssigkeit enthält Viruspartikel zusammen mit vom Wirt stammenden Kontaminanten.

Lassen Sie die Flüssigkeit durch einen Tiefenfilter laufen, um große Verunreinigungen zurückzuhalten, während kleinere Verunreinigungen und Viren passieren können.

Danach wird die gefilterte Flüssigkeit in ein Filtersystem geladen, wo sie tangential über eine Membranoberfläche fließt.

Kleinere Verunreinigungen passieren die Membran, während das Virus zurückgehalten und angereichert wird.

Den konzentrierten Virus auf ein Dichtegradienten auftragen und zentrifugieren. Der Virus bildet eine deutliche Bande, wo seine Dichte der des Gradienten entspricht.

Sammeln Sie die virusreiche Bande in einer Dialyseskassette und geben Sie sie in ein Pufferlösung. Die Gradientenkomponenten diffundieren nach außen, während Wasser aus dem Puffer durch die semipermeable Membran in die Kassette diffundiert.

Als Nächstes wird die Kartusche in eine hypertonische Lösung gegeben, um Wasser zu entziehen und das gereinigte Virus zu konzentrieren.

Zur Reinigung des Newcastle Disease Virus oder NDV prime zunächst das zuvor e