Beurteilung der phagenvermittelten Hemmung des Bakterienwachstums mittels Messung der optischen Dichte

Beginnen Sie mit einer Mehrfachbrüheplatte, die eine seriell verdünnte Phagensuspension in nährstoffreichem Brühe als Behandlung und phagenfreie Brühe als Kontrolle enthält.

Fügen Sie E. coli in jede Vertiefung hinzu. Messen Sie mithilfe eines Spektrophotometers die Ausgangs-Optische Dichte (OD), um die anfängliche Bakterienkonzentration zu erfassen.

Als Nächstes inkubieren Sie die Platte, um das bakterielle Wachstum und die Phageninfektion zu ermöglichen.

In der Kontrolle nutzen die Bakterien Nährstoffe und vermehren sich, wodurch der optische Dichtewert (OD) ansteigt.

Bei der Behandlung binden Phagen an bakterielle Oberflächenrezeptoren und injizieren ihr Genom in das Zytoplasma.

Unter Verwendung der Wirtszellmaschinerie repliziert das virale Genom und produziert virale Proteine, die sich zu neuen Viruspartikeln zusammenlagern. Diese Partikel lysieren die Zelle und setzen Nachkommen frei.

Messen Sie den OD in Intervallen, um das bakterielle Wachstum zu vergleichen.

Die Kontrollbohrungen zeigen einen progressiven Anstieg der Extinktion, während die mit Phagen behandelten Bohrungen niedrigere Extinktionswerte aufweisen, wobei stärkere Abnahmen bei höheren Phagenkonzentrationen beobachtet