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Mikrobiologie
0 Aufrufe • 3:09 Min. • September 30th, 2026
Entnehmen Sie virusinfizierte Insektenkörper, die in einem Puffer mit einem Chelatbildner suspendiert sind.
Homogenisieren Sie, um die Insekten-Gewebe zu zerkleinern und intrazelluläre Bestandteile freizusetzen, einschließlich viraler Partikel und reaktiver Metallionen.
Das Chelatbildner bindet Metallionen, verhindert die Bildung reaktiver Sauerstoffspezies und schützt virale Partikel vor oxidativen Schäden.
Zentrifugieren Sie im Ultrazentrifugator, um das Virus und unlösliche Bestandteile zu pelletieren, und entsorgen Sie danach den Überstand.
Fügen Sie einen Puffer mit Salzen und Detergens hinzu und resuspendieren Sie das Pellet durch wiederholtes Auf- und Abpipettieren. Das Detergens löst die lipidreichen Rückstände auf, um die assoziierten Viruspartikel freizusetzen.
Zentrifugieren Sie, um unlösliche Bestandteile zu pelletieren. Sammeln Sie den Überstand, der virale Partikel enthält.
Filtrieren Sie das Überstand, um restliche Partikel zu entfernen, und sammeln Sie das Virus enthaltende Filtrat.
Dialysieren Sie das Filtrat in Wasser bei niedriger Temperatur, um überschüssiges Detergens und Puffer-Salze zu entfernen.
Ersetzen Sie das Wasser regelmäßig, bis die Viruspartikel ausfallen. De
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