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Mikrobiologie
0 Aufrufe • 3:08 Min. • September 30th, 2026
Beginnen Sie mit einem Minigenom-Plasmid, das das Genom des Ebola-Virus nachahmt und virale Strukturproteine, Glykoproteine sowie einen Luciferase-Reporter kodiert.
Fügen Sie Hilfsplasmide hinzu, die die für Replikation und Transkription essentiellen Komponenten der T7-Polymerase, des viralen Nukleoproteins und der viralen Polymerase kodieren.
Fügen Sie ein lipidbasiertes Transfektionsreagenz zu den Plasmiden hinzu, wirbeln Sie die Mischung kurz auf und inkubieren Sie sie zur Bildung von Plasmid-Lipid-Komplexen.
Dieses Gemisch zu menschlichen Nierenzellen hinzufügen, vorsichtig mischen und inkubieren.
Der Lipidkomplex fusioniert mit der Zelle. Plasmide gelangen in die Zelle.
Die Helferplasmide kodieren für ihre jeweiligen Proteine.
Anschließend transkribiert die T7-Polymerase das Minigenom in virale genomische RNA, die sofort mit Nukleoproteinen beschichtet wird.
Der virale Polymerase-Komplex bindet an die virale genomische RNA und transkribiert sie in virale mRNA-Moleküle. Diese mRNA-Moleküle produzieren virale Strukturproteine und Glykoproteine.
Die viralen Proteine assemblieren sich zu nicht-pathogenen, transkriptions- und replikationsfähigen Virus-ähnlichen Partikeln oder trVLPs, die d
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