Erzeugung eines rekombinanten Masernvirus, das ein immunostimulatorisches Protein kodiert

Beginnen Sie mit einer Liposomensuspension, die das Plasmid des rekombinanten Masernvirus-Antigenoms und Hilfsplasmide, die essentielle virale Proteine kodieren, einschließt.

Das Antigenom-Plasmid enthält die cDNA des Masernvirusgenoms, modifiziert zur Expression immunstimulierender Proteine und eines fluoreszierenden Reporters in infizierten Zellen.

Entnehmen Sie eine Virusproduzenten-Zellkultur, die Antibiotika zur Verhinderung von Kontaminationen enthält.

Fügen Sie die Liposomensuspension der Kultur hinzu und inkubieren Sie sie.

Die Liposomen fusionieren mit der Zellmembran, um die Plasmide zu übertragen.

Die Maschinerie der Wirtszelle transkribiert die Antigenom-cDNA in RNA und die Hilfsplasmide in mRNA, wodurch die Proteinsynthese und die Bildung des viralen Replikationskomplexes ermöglicht wird. Dieser Komplex produziert genomische RNA, die die Expression viraler Proteine ermöglicht.

Genomische RNA assembliert sich mit viralen Proteinen, um rekombinante virale Partikel zu bilden.

Infizierte Zellen exprimieren außerdem das fluoreszierende Reportergenprotein zur mikroskopischen Visualisierung und produzieren das viruscodierte immunstimulierende Protein.

Infizierte Zellen bilden mehrker