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Mikrobiologie
0 Aufrufe • 4:32 Min. • September 30th, 2026
Nehmen Sie serielle Verdünnungen einer Respiratory-Syncytial-Virus-(RSV-)Suspension vor.
Inokulieren Sie jede Verdünnung in separate Vertiefungen einer Mehrfachbrunnenplatte, die mit RSV-empfänglichen Säugetierzellen besiedelt wurde.
Inkubieren Sie, damit das Virus an die Zelloberflächenrezeptoren binden, die Membranfusion vermitteln und sein Genom in das Zytoplasma freisetzen kann.
Als Nächstes wird ein halbfestes Übertragungsmedium aufgebracht, um die Virusdiffusion zu begrenzen, und anschließend inkubiert.
Die infizierten Zellen exprimieren das virale Fusionsprotein, das die Zell-zu-Zell-Fusion vermittelt und mehrkernige Strukturen namens Syncytien bildet.
Während die virale Replikation fortschreitet, degenerieren diese Synzytien und bilden klare Zonen, die als Plaques bekannt sind.
Schütteln Sie die Platte vorsichtig, um die Überlagerung zu entfernen, und spülen Sie die Zellen aus, um Ablagerungen zu beseitigen.
Ein Färbeverfahren anwenden, um lebensfähige Zellen anzufärben, wodurch die Plaques ungefärbt bleiben.
Entfernen Sie den Farbstoff, desinfizieren Sie die Platte mit Bleichmittel und spülen Sie sie mit Wasser ab.
Lassen Sie die Platte an der Luft trocknen.
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