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Mikrobiologie
0 Aufrufe • 4:36 Min. • September 30th, 2026
Beginnen Sie mit Lentiviren, die ein Antibiotikaresistenzgen tragen.
Zentrifugieren, um den Zelltrümmern zu trennen. Sammeln Sie das Überstand, der die Viren enthält, und filtrieren Sie ihn durch eine tensidfreie Membran.
Dies ermöglicht es den Lentiviren, hindurchzugehen, während Verunreinigungen zurückgehalten werden.
Zentrifugieren Sie im Ultrazentrifugator, um die Viren zu konzentrieren. Entfernen Sie den Überstand und geben Sie Puffer hinzu, um die Viren erneut in Lösung zu bringen.
Überführen Sie die Suspension anschließend in ein Mikrozentrifugenröhrchen und wirbeln Sie sie um.
Zentrifugieren, um Blasen zu entfernen. Anschließend die Viren einem Infektionsmedium hinzufügen, das embryonale Stammzellen der Maus enthält, und mischen.
Zentrifugieren, um den Virus-Zell-Kontakt zu verbessern, dann inkubieren.
Die Viren übertragen ihre Genome in die Zellen.
Entfernen Sie das Medium, fügen Sie frisches Medium hinzu und inkubieren Sie.
Das virale Genom wird in DNA umgewandelt und integriert sich in das Wirtsgenom, wodurch mRNA produziert wird, die die Synthese des Antibiotikaresistenzproteins steuert.
Ersetzen Sie das Medium durch frisches Medium, das mit dem Selektionsantibiotikum ergänzt wur
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