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Mikrobiologie
0 Aufrufe • 4:05 Min. • September 30th, 2026
Innerhalb eines Biocontainmentschranks eine hochansteckende virale Suspension in eine Kapsel mit TEM-Gittern aufsaugen.
Horizontal inkubieren, um eine gleichmäßige Anheftung der Viren auf dem Objektträger zu fördern.
Entfernen Sie die Suspension mit nicht gebundenen Viren und geben Sie anschließend ein Fixierungsmittel zur Vernetzung von Proteinen hinzu, um die virale Struktur zu erhalten und die Infektiosität zu verringern.
Nach der Inkubation waschen, um restlichen Fixator zu entfernen.
Fügen Sie einen elektronendichten negativen Farbstoff hinzu, der an die das Virus umgebenden Gitter bindet und den Kontrast während der Bildgebung verbessert.
Entfernen Sie die Pipette und tupfen Sie die Gitter ab, um überschüssige Färbung zu entfernen.
Platzieren Sie die Kapsel in ein Zentrifugenröhrchen mit osmiumtetroxidgetränktem Filterpapier, verschließen Sie das Röhrchen und inkubieren Sie es zur Dampffixierung.
Osmiumtetroxid stabilisiert die Struktur der Lipidmembran, verbessert den Abbildungskontrast und inaktiviert das Virus vollständig, wodurch eine sichere Entnahme aus der Biocontainment-Einrichtung ermöglicht wird.
In einer TEM-Anlage die Gitter spülen, an der Luft trocknen lassen und zur Bil
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