JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Mikrobiologie
0 Aufrufe • 3:24 Min. • September 30th, 2026
Beginnen Sie mit einem kohlenstoffbeschichteten Gitter für die Transmissionselektronenmikroskopie oder TEM, das auf einer Glasplatte platziert ist.
Platzieren Sie den Objektträger in einer Kammer und führen Sie eine Glühentladung durch, um die Kohlenstoffoberfläche hydrophil zu machen, was eine gleichmäßige Probenauftragung ermöglicht.
Entfernen Sie den Objektträger, halten Sie das Gitter mit einer Pinzette und geben Sie eine Suspension von Hepatitis-E-Virus-(HEV-)Nanopartikeln darauf.
Diese Nanopartikel bestehen aus rekombinanten HEV-Kapsidproteinen und enthalten keine Nukleinsäuren sowie keine weiteren viralen Proteine.
Inkubieren, damit die Nanopartikel an der Gitteroberfläche adsorbieren können. Anschließend mit Filterpapier abtupfen, um die überschüssige Suspension aufzunehmen.
Spülen Sie das Gitter mit entionisiertem Wasser, um nicht adsorbierte Nanopartikel zu entfernen, und tupfen Sie es erneut ab.
Uranylacetat-Färbung hinzufügen und kurz inkubieren.
Uranylacetat bildet einen elektronendichten Hintergrund um die Nanopartikel, wodurch der Kontrast während der TEM-Aufnahme verbessert wird.
Überschüssigen Farbstoff abblotten und das Objektträgergitter zur Trocknung in eine entfeuchte
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