Entparaffinisierung und Rehydrierung von Gewebeschnitten: ein zweistufiges Verfahren zur Entfernung von Paraffinwachs aus FFPE-Gewebeschnitten mit anschließender Geweberehydrierung
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Krebsforschung
0 Aufrufe • 2:43 Min. • April 30th, 2023
Die formalinfixierte Paraffineinbettungs- oder FFPE-Technik ermöglicht die Konservierung von fixierten, dehydrierten und geklärten Gewebeproben in Paraffinblöcken für die Langzeitlagerung. FFPE bewahrt Proteine und andere lebenswichtige intrazelluläre Bestandteile, ohne die Gewebemorphologie zu beeinträchtigen.
Die Entparaffinisierung oder die Entfernung von Paraffinwachs, das das eingebettete Gewebe umgibt, ist ein kritischer Schritt vor der Verarbeitung von FFPE-Gewebeproben für die nachgelagerte Analyse. Um mit der Entparaffinierung zu beginnen, beginnen Sie mit einem Objektträger mit einem ungefärbten FFPE-Gewebeschnitt von Interesse mit einer angemessenen Dicke.
Tauchen Sie den Gewebeschnitt in ein Xylolbad und inkubieren Sie ihn für die gewünschte Dauer. Xylol, ein organisches Lösungsmittel, löst das Paraffinwachs auf, das sich in das Gewebe eingenistet und eingedrungen ist. Durch die vollständige Entfernung von Paraffinwachs wird die fixierte und dehydrierte transparente Gewebeprobe freigelegt.
Nach der Entparaffinierung ist die Probe mit absolutem Ethanol zu behandeln. Ethanol verdrängt und entfernt alle Spuren von Xylol aus dem Gewebeschnitt. Tauchen Sie anschließend das G
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