Whole Mount Präparation des Mausdarms: Verwendung eines einfachen Darmschneidegeräts zur Präparation des Whole Mount
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Krebsforschung
0 Aufrufe • 4:32 Min. • April 30th, 2023
Die Whole-Mount-Analyse ermöglicht die Visualisierung mehrdimensionaler Gewebequerschnitte unter Beibehaltung der strukturellen Wechselwirkungen zwischen Zellen und ihrer Mikroumgebung.
Um ganze Darmhügel zuzubereiten, beginnen Sie mit einem frisch geernteten Mäusedarm. Entfernen Sie das Mesenterium - Falten des Peritonealgewebes - aus dem Darm. Spülen Sie den Darm mit einem gekühlten Puffer, um alle Fäkalien zu entfernen.
Als nächstes schneidest du den Blinddarm heraus und zerlegst den Darm in gleiche Segmente. Machen Sie kleine Schnitte in den Darmsegmenten, um die darin enthaltene Flüssigkeit abzulassen.
Führen Sie vorsichtig einen nassen Edelstahlstab in die Darmsegmente ein. Positionieren Sie nun diese Stäbe in Halteschlitzen an der Basis der individuell angefertigten Darmschneidevorrichtung. Setzen Sie den Deckel des Geräts über den Sockel.
Mit abgewinkelten Stäben am Deckel als Leitfaden die Darmsegmente in Längsrichtung einschneiden. Nehmen Sie den Deckel vom Gerät ab. Befeuchten Sie die Segmente. Rollen Sie die Stange vorsichtig zur Seite, um die Segmente zu lösen und flach zu spreizen.
Tauchen Sie die Segmente in ein Bad mit einem geeigneten Fixiermittel und inkubieren Si
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