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Krebsforschung
0 Aufrufe • 4:37 Min. • April 30th, 2023
Die Darmschleimhaut ist mit Vorsprüngen oder Zotten und Einstülpungen oder Krypten bedeckt. Krypten sind die Darmdrüsen, die in erster Linie Verdauungsenzyme absondern.
Um Dünndarmkrypten zu isolieren, positionieren Sie zunächst eine betäubte Maus in Rückenlage auf einem Sezierbrett. Präparieren Sie das Bauchfell mit einer Schere in Längsrichtung, um das Verdauungssystem freizulegen.
Lokalisieren Sie den Dünndarm und ziehen Sie ihn vorsichtig aus dem Körper der Maus nach oben. Schneide den Darm an der Basis ab. Den geernteten Darm in eine Schüssel mit einem geeigneten Puffer geben. Schneiden Sie den Darm in Längsrichtung durch und legen Sie das Lumen frei.
Lege den Darm mit der leuchtenden Seite nach oben auf ein Schneidebrett, um die Zotten freizulegen. Bewegen Sie einen abgewinkelten Glasobjektträger über die Darmoberfläche, um die Zotten abzukratzen und die gesamten Krypten freizulegen.
Schneiden Sie den Darm in winzige Stücke und geben Sie die Stücke in ein Röhrchen mit einem eiskalten Puffer, um sicherzustellen, dass die Krypten so wenig wie möglich beschädigt werden.
Als nächstes mit EDTA behandeln und inkubieren. EDTA bewirkt, dass sich die gesamten Krypten von der Darmschle
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