Extraktion einer intakten Niere aus einer Maus: Eine Technik zur Gewinnung einer Niere ohne Nierenkapsel aus Mausmodellen

Bei Nagetieren hat die Niere eine schützende fibröse äußere Hülle, die Nierenkapsel genannt wird, und eine Schicht aus perinephrischem Fett darüber. Um die murine Niere ohne die umgebenden Schichten zu extrahieren, positionieren Sie zunächst eine euthanasierte Maus in Rückenlage auf einem Operationsbett.

Schnitte die Bauchhaut und die Muskelschichten. Machen Sie weiterhin Längsschnitte, bis die Bauchhöhle freigelegt ist. Lokalisieren Sie dann den Darm und heben Sie ihn leicht an. Schneiden Sie unter den Darm und entfernen Sie sie aus dem Körper der Maus, um die Nieren freizulegen.

Suchen Sie als Nächstes den Harnleiter und durchtrennen Sie das darunter liegende Bindegewebe, so dass sich die Nieren von der Bauchhöhle trennen. Schneiden Sie beide Nieren einzeln heraus. Legen Sie die extrahierte Niere in eine Schale mit einem eiskalten Puffer und betrachten Sie sie unter einem Präpariermikroskop.

Entfernen Sie nun das perinephrische Fett aus der Niere, um das Nierenbecken sichtbar zu machen, einen trichterförmig erweiterten Teil des Harnleiters. Schneiden Sie einen Teil des Nierenbeckens von der Basis ab, um die Reste des Harnleiters zu entfernen.

Zum Schluss stechen Sie die äußere fibröse Nierenkapsel oberflächlich ein. Ziehen Sie mit der geschaffenen Öffnung vorsichtig die gesamte Nierenkapsel von der Nierenoberfläche ab. Dies hilft, die Nebenniere - eine endokrine Drüse, die an der Nierenkapsel befestigt ist - zu entfernen und eine intakte Niere zu erhalten.

Mit einer inneren Gewebezange und einer inneren Dissektionsschere den Darm einklemmen und von der Bauchdecke wegheben. Gleichzeitig wird die Unterseite des Darms am proximalen Zwölffingerdarm und am distalen Dickdarm vom Körper befreit, um Zugang zum retroperitonealen Raum zu erhalten, in dem sich die Nieren befinden.

Kneifen und heben Sie das distale Ende des Harnleiters vorsichtig mit einer Gewebezange an. Schneiden Sie mit der Präparierschere unter dem eingeklemmten Harnleiter in Richtung Niere hindurch, bis er sich vom umgebenden Bindegewebe gelöst hat. Sobald die Nieren freigelegt sind, extrahieren Sie sie einzeln.

Füllen Sie eine mit Silikonelastomer beschichtete Schale mit eiskalter KRB-Lösung. Bringen Sie die Niere in die Sezierschale und stellen Sie sicher, dass sie vollständig untergetaucht ist. Verwenden Sie eine feine Federschere und eine innere Pinzette, um Fettgewebe von der Basis der Niere zu entfernen, um das distale Nierenbecken oder RP und den proximalen Harnleiter freizulegen.

Entfernen Sie den proximalen Harnleiter und einen Teil des distalen RP mit einer feinen Federschere und einer Pinzette von der Basis. Durchstechen Sie die äußere Nierenkapsel mit einer Pinzette mit feiner Spitze und winkeln Sie die Spitzen vom Nierenkörper weg ab. Drücken Sie mit einer Pinzette mit jeder Hand die losen Enden der Kapsel zusammen und schälen Sie sie, bis die verbleibende Membran der Nierenkapsel vollständig entfernt ist.