Herstellung von Krebs-Sphäroidblöcken durch Schockfrosten: Ein Verfahren zur Konservierung von Krebs-Sphäroiden in gefrorenen Matrixblöcken

Krebs-Sphäroide sind dreidimensionale zelluläre Aggregate von Tumorzellen. Diese Sphäroide können in die Kollagenmatrix eingebettet werden, was zur Bildung von Sphäroidblöcken führt. Um einen Sphäroidblock schockfrosten zu lassen, platzieren Sie zunächst einen Kollagen-Gel-Sphäroidblock in der Mitte einer Histologieform.

Spülen Sie den Block mit einem geeigneten Puffer ab und ergänzen Sie die Form mit einer Fixierlösung. Inkubieren, damit diese Lösung in die Sphäroide eindringen und die zellulären Proteine vernetzen kann. Dieser Schritt trägt dazu bei, die Sphäroidstruktur für das nachfolgende Verfahren beizubehalten. Als nächstes aspirierst du die Fixierlösung.

Legen Sie den Sphäroid-Gelblock in eine frische Histologieform, die eine dünne Schicht Einbettungsmedium enthält. Überlagern Sie es mit mehr Einbettungsmedium, um den Sphäroidblock vollständig zu untertauchen. Tauchen Sie die Form schließlich für kurze Zeit in ein Flüssigstickstoffbad.

Durch das schnelle Einfrieren wird die Bildung größerer Eiskristalle im Inneren von Sphäroiden verhindert. Es hilft dabei, die Integrität der Sphäroide zu erhalten, ohne mechanische Schäden zu verursachen. Sobald sich die Einbettungsmediumsch