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Krebsforschung
0 Aufrufe • 3:04 Min. • April 30th, 2023
Exosomen - nanogroße, aus Zellen gewonnene Membranvesikel - haben das Potenzial, als therapeutische Verabreichungsmittel für doppelsträngige kleine interferierende RNA oder siRNA
zu dienen.Nach der Freisetzung in das Zytoplasma der Zielzelle bindet siRNA an den RNA-induzierten Silencing-Komplex. Der aktivierte Komplex erkennt und bindet dann an spezifische mRNA, reguliert deren Expression negativ und vermittelt das Gen-Silencing.
Um siRNA in Exosomen einzukapseln, kühlt man zunächst eine Elektroporationsküvette auf Eis. Mischen Sie anschließend Exosomen und spezifische siRNA in einem Röhrchen im gewünschten Verhältnis unter Verwendung eines geeigneten Elektroporationspuffers. Gib diese Mischung nun in die vorgekühlte Küvette.
Verschließen Sie die Küvette und setzen Sie sie in den Küvettenhalter des Elektroporators ein. Drehen Sie das Drehrad, um sicherzustellen, dass die Küvette Kontakt mit den Elektroporationselektroden hat. Führen Sie nun das ausgewählte Elektroporationsprogramm aus.
Bei der Elektroporation stören die elektrischen Pulse die Phospholipid-Doppelschicht der Exosomen, die im leitfähigen Puffer suspendiert sind. Dies führt zur Bildung von transienten Poren in der Exo
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