Preparation of Kidney Flat Mount: Ein Verfahren zum Präparieren und Vorbereiten eines Flat Mount für die mikroskopische Analyse der Niere eines adulten Zebrafisches

Der erwachsene Zebrafisch besteht aus einer einzelnen, abgeflachten Niere, die durch Bindegewebe mit der dorsalen Körperwand verbunden ist. Er besteht aus drei Hauptregionen: Kopf, Rumpf und Schwanz. Die Funktionseinheit der Niere, die Nephrone, sind stark verzweigt und münden in zwei große Sammelkanäle.

Um die Niere zu isolieren, bereiten Sie zunächst einen euthanasierten erwachsenen Zebrafisch mit der Bauchseite nach oben vor. Machen Sie einen Schnitt hinter dem Operculum - einem knöchernen Lappen, der die Kiemen bedeckt - um den Kopf zu entfernen. Machen Sie anschließend einen weiteren Schnitt vom Kopf bis zur Basis der Schwanzflosse, um die inneren Organe freizulegen und zu entfernen.

Stecken Sie nun die Körperwände auf, um die Niere zu visualisieren. Präparieren Sie das darunterliegende Bindegewebe, um die Niere von der Rückenwand zu lösen. Füllen Sie das Organ in ein Fläschchen mit einem geeigneten Puffer und waschen Sie es gründlich, um Ablagerungen zu entfernen. Der Puffer trägt dazu bei, physiologische Bedingungen zu schaffen. Legen Sie nach dem Waschen die mit Puffer hydratisierte Niere auf einen Objektträger.

Achten Sie darauf, dass die Niere vollständig abgeflacht ist,